導讀 關于dna測序原理和應用,dna測序原理這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!1、就是利用一
關于dna測序原理和應用,dna測序原理這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、就是利用一種DNA聚合酶來延伸結(jié)合在待定序列模板上的引物。
2、直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。
3、每一次序列測定由一套四個單獨的反應構(gòu)成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。
4、由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。
5、終止點由反應中相應的雙脫氧而定。
6、每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調(diào)整,使反應得到一組長幾百至幾千堿基的鏈終止產(chǎn)物。
7、它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高分辨率變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理后可用X-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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