霽彩華年,因夢(mèng)同行—— 慶祝深圳霽因生物醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究院成立十周年 情緒益生菌PS128助力孤獨(dú)癥治療,權(quán)威研究顯示可顯著改善孤獨(dú)癥癥狀 PARP抑制劑氟唑帕利助力患者從維持治療中獲益,改寫晚期卵巢癌治療格局 新東方智慧教育發(fā)布“東方創(chuàng)科人工智能開發(fā)板2.0” 精準(zhǔn)血型 守護(hù)生命 腸道超聲可用于檢測(cè)兒童炎癥性腸病 迷走神經(jīng)刺激對(duì)抑郁癥有積極治療作用 探索梅尼埃病中 MRI 描述符的性能和最佳組合 自閉癥患者中癡呆癥的患病率增加 超聲波 3D 打印輔助神經(jīng)源性膀胱的骶神經(jīng)調(diào)節(jié) 胃食管反流病患者耳鳴風(fēng)險(xiǎn)增加 間質(zhì)性膀胱炎和膀胱疼痛綜合征的臨床表現(xiàn)不同 研究表明 多語(yǔ)言能力可提高自閉癥兒童的認(rèn)知能力 科學(xué)家揭示人類與小鼠在主要癌癥免疫治療靶點(diǎn)上的驚人差異 利用正確的成像標(biāo)準(zhǔn)改善對(duì)腦癌結(jié)果的預(yù)測(cè) 地中海飲食通過腸道細(xì)菌變化改善記憶力 讓你在 2025 年更健康的 7 種驚人方法 為什么有些人的頭發(fā)和指甲比其他人長(zhǎng)得快 物質(zhì)的使用會(huì)改變大腦的結(jié)構(gòu)嗎 飲酒如何影響你的健康 20個(gè)月,3大平臺(tái),300倍!元育生物以全左旋蝦青素引領(lǐng)合成生物新紀(jì)元 從技術(shù)困局到創(chuàng)新錨點(diǎn),天與帶來(lái)了一場(chǎng)屬于養(yǎng)老的“情緒共振” “華潤(rùn)系”大動(dòng)作落槌!昆藥集團(tuán)完成收購(gòu)華潤(rùn)圣火 十七載“冬至滋補(bǔ)節(jié)”,東阿阿膠將品牌營(yíng)銷推向新高峰 150個(gè)國(guó)家承認(rèn)巴勒斯坦國(guó)意味著什么 中國(guó)海警對(duì)非法闖仁愛礁海域菲船只采取管制措施 國(guó)家四級(jí)救災(zāi)應(yīng)急響應(yīng)啟動(dòng) 涉及福建、廣東 女生查分查出608分后,上演取得理想成績(jī)“三件套” 多吃紅色的櫻桃能補(bǔ)鐵、補(bǔ)血? 中國(guó)代表三次回?fù)裘婪焦糁肛?zé) 探索精神健康前沿|情緒益生菌PS128閃耀寧波醫(yī)學(xué)盛會(huì),彰顯科研實(shí)力 圣美生物:以科技之光,引領(lǐng)肺癌早篩早診新時(shí)代 神經(jīng)干細(xì)胞移植有望治療慢性脊髓損傷 一種簡(jiǎn)單的血漿生物標(biāo)志物可以預(yù)測(cè)患有肥胖癥青少年的肝纖維化 嬰兒的心跳可能是他們說(shuō)出第一句話的關(guān)鍵 研究發(fā)現(xiàn)基因檢測(cè)正成為主流 血液測(cè)試顯示心臟存在排斥風(fēng)險(xiǎn) 無(wú)需提供組織樣本 假體材料有助于減少靜脈導(dǎo)管感染 研究發(fā)現(xiàn)團(tuán)隊(duì)運(yùn)動(dòng)對(duì)孩子的大腦有很大幫助 研究人員開發(fā)出診斷 治療心肌炎的決策途徑 兩項(xiàng)研究評(píng)估了醫(yī)療保健領(lǐng)域人工智能工具的發(fā)展 利用女子籃球隊(duì)探索足部生物力學(xué) 抑制前列腺癌細(xì)胞:雄激素受體可以改變前列腺的正常生長(zhǎng) 肽抗原上的反應(yīng)性半胱氨酸可能開啟新的癌癥免疫治療可能性 研究人員發(fā)現(xiàn)新基因療法可以緩解慢性疼痛 研究人員揭示 tisa-cel 療法治療復(fù)發(fā)或難治性 B 細(xì)胞淋巴瘤的風(fēng)險(xiǎn) 適量飲酒可降低高危人群罹患嚴(yán)重心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn) STIF科創(chuàng)節(jié)揭曉獎(jiǎng)項(xiàng),新東方智慧教育榮膺雙料殊榮 中科美菱發(fā)布2025年產(chǎn)品戰(zhàn)略布局!技術(shù)方向支撐產(chǎn)品生態(tài)縱深! 從雪域高原到用戶口碑 —— 復(fù)方塞隆膠囊的品質(zhì)之旅
您的位置:首頁(yè) >國(guó)外科研 >

子孢子肝浸潤(rùn)抗體

脊椎動(dòng)物宿主的瘧疾感染始于被感染的蚊子在其皮膚中沉積孢子。然后,子孢子進(jìn)入循環(huán),通過子孢子表面的周孢子蛋白(CSP)與肝血竇中的糖胺聚糖(GAGs)之間的強(qiáng)相互作用,迅速捕獲肝血竇。首次報(bào)道子孢子CSP與肝臟GAGs的結(jié)合發(fā)生在肝細(xì)胞基底部分之外(Frevert等,1993;Cerami等人,1994年)。隨后的研究證實(shí),子孢子CSP與星狀細(xì)胞合成的GAGs結(jié)合,并通過內(nèi)皮腔突出到血管腔中(Pradel等人,2002)。這種相互作用不是宿主細(xì)胞識(shí)別的義務(wù)(Frevert等人,1996年)。顯微研究表明,子孢子主要通過枯否細(xì)胞離開循環(huán)(Meis等,1983,1985;Vreden,1994年;Pradel和Frevert等人,2001年)是竇內(nèi)襯的一部分,隨后是潛在肝細(xì)胞的感染(Frevert等人,2005年)。在隨后的研究中,使用了細(xì)胞內(nèi)共聚焦顯微鏡和在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞系,這提供了孢子也可以通過內(nèi)皮細(xì)胞離開循環(huán)的證據(jù)(Tavares等人,2013年)。最近,枯否細(xì)胞CD68被鑒定為孢子體受體,這表明優(yōu)先孢子體與枯否細(xì)胞相互作用的分子基礎(chǔ)。在cd68敲除小鼠中,與野生型小鼠相比,小鼠的肝臟侵襲減少了70%以上(Cha等人,2015年)。

CD68作為子孢子受體的鑒定來(lái)自從噬菌體文庫(kù)中篩選的三種肽-p39、P61和P52(Cha等人,2015)。這些肽不僅選擇性結(jié)合庫(kù)普弗細(xì)胞表面,而且競(jìng)爭(zhēng)性抑制庫(kù)普弗細(xì)胞進(jìn)入肝實(shí)質(zhì)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明,這些與枯否細(xì)胞表面CD68蛋白結(jié)合的肽是瘧原蟲GAPDH在孢子表面的模擬表位(結(jié)構(gòu)模擬物)。CD68和pGAPDH之間存在直接的相互作用,這對(duì)于庫(kù)普弗細(xì)胞的子孢子穿越非常重要(Cha等人,2016)。

GAPDH除了在糖酵解中發(fā)揮主要作用外,還被認(rèn)為是候選疫苗,因?yàn)樗霈F(xiàn)在幾種病原微生物的表面,并作為宿主細(xì)胞識(shí)別和入侵的配體(潘喬李菲舍蒂等,1992,1997;Argiro等人,2000年;Rosinha等人,2002年;博格曼等人,2004年;Boel等人,2005年)。由于GAPDH在進(jìn)化過程中是保守的,其氨基酸序列在病原體和高等生物之間高度相似,用全蛋白作為疫苗抗原是不現(xiàn)實(shí)的。因此,確定能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性抗體的寄生蟲的gap-dh特異性表位非常重要(Perez-Casal Potter,2016)。我們的研究表明,用klh標(biāo)記的P39肽(一種GAPDH mimo壁)免疫小鼠可以獲得很強(qiáng)的保護(hù)性免疫,而抗P39血清可以識(shí)別a GAPDH的蛋白。在這里,我們報(bào)道了一種表位定位方法,用于通過使用抗p39抗體來(lái)鑒定作為保護(hù)性表位的berghei GAPDH (PbGAPDH)的結(jié)構(gòu)域。我們表明PbGAPDH獨(dú)特的保護(hù)性表位位于蛋白質(zhì)的C端,預(yù)計(jì)位于折疊蛋白質(zhì)的暴露口袋中。

結(jié)果

多壁多肽P39、P61和P52作為免疫原性抗原保護(hù)伯氏瘧原蟲子孢子免受感染的評(píng)價(jià)

通過噬菌體展示肽庫(kù),我們發(fā)現(xiàn)了三種肽-p39、P61和p52-它們與庫(kù)普弗細(xì)胞結(jié)合,并以這種方式強(qiáng)烈抑制子孢子的結(jié)合和進(jìn)入(Cha等人,2015)。我們還發(fā)現(xiàn)P39肽免疫可以有效保護(hù)小鼠免受蚊蟲叮咬引起的伯氏平孢子蟲感染。圖1A顯示抗p39抗體可以識(shí)別與GAPDH具有相同流動(dòng)性的子孢子蛋白。然而,另外兩個(gè)肽p61和p52尚未被鑒定。我們用klh標(biāo)記合成的多壁多肽免疫小鼠。所有三種肽的抗體都能識(shí)別重組pGAPDH(圖1B)。然而,每種肽似乎都模擬了PbGAPDH的不同表位(圖1C)。接下來(lái),我們?cè)u(píng)估了每種候選mimo壁抗原的免疫原性和保護(hù)潛力。用三種多壁抗原的單一或不同組合免疫小鼠。然而,各組的總抗體濃度沒有顯著差異,P39的特異性免疫原性明顯高于P52(圖2A)。每次免疫后,兩只感染的按蚊叮咬挑戰(zhàn)貝氏按蚊。與klh免疫組相比,P39肽的免疫保護(hù)作用最強(qiáng),對(duì)子孢子感染的抑制率為67%(圖2B)。這些初始數(shù)據(jù)表明P39具有最強(qiáng)的保護(hù)潛力,因此它被用于所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

(a)抗p39抗體在伯氏瘧原蟲子孢子裂解物的蛋白質(zhì)印跡中特異性識(shí)別PbGAPDH。雨披染色和抗肌動(dòng)蛋白抗體作為負(fù)荷對(duì)照?!癝”:從受感染的千金藤唾液腺中純化的子孢子的裂解物;“M”:從斯蒂芬斯未感染的唾液腺中提取的假裂解物。抗csp抗體作為子孢子裂解物的陽(yáng)性對(duì)照。多克隆抗pbgapdh抗體(紅色箭頭)以與抗p39帶相同的遷移率識(shí)別子孢子gapdh帶。(b)每個(gè)mimo壁多肽(P39、P61和P52)的抗體識(shí)別具有相同的流程。

動(dòng)性的條帶為PbGAPDH(紅色箭頭),而不是pET標(biāo)記蛋白(藍(lán)色箭頭)。每個(gè)面板顯示兩個(gè)通道,左邊僅包含pET標(biāo)記蛋白,右邊是標(biāo)記的重組PbGAPDH蛋白。用于檢測(cè)印跡的抗體顯示在每個(gè)面板底部??箻?biāo)記和抗klh抗體分別作為陽(yáng)性和陰性對(duì)照。用抗小鼠GAPDH抗體作為陽(yáng)性對(duì)照,鑒定GAPDH蛋白。重組蛋白和標(biāo)記蛋白的位置由右側(cè)箭頭指示。所有的數(shù)據(jù)都代表了兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)。(C)每個(gè)抗肽抗體都明確識(shí)別其自身的肽。顯示在每個(gè)面板頂部的生物素化肽與鏈霉親和素涂層的ELISA板的孔結(jié)合,并被每個(gè)面板底部的抗體結(jié)合測(cè)試。沒有發(fā)現(xiàn)交叉反應(yīng)的證據(jù)。所有數(shù)據(jù)都代表兩個(gè)獨(dú)立的化驗(yàn)。

mimo墻面多肽作為保護(hù)P·伯格伊感染的抗原的評(píng)估。

(一)肽免疫原性。小鼠免疫與單一抗原(50μg KLH-conjugated肽),結(jié)合兩個(gè)抗原(25μg每個(gè)),或三種抗原的結(jié)合(16.7μg每個(gè)),表示。每隔2周注射三針后,用ELISA法測(cè)定每只小鼠產(chǎn)生的特異性抗體數(shù)量。頂部面板:總抗體濃度。每組小鼠的數(shù)量用括號(hào)表示。底部面板:特定抗體濃度。所有的數(shù)據(jù)都代表了兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)。錯(cuò)誤條表示SD。(B)肽免疫預(yù)防感染。接種疫苗的小鼠受到兩只被感染的史蒂芬尼蚊子的叮咬。用薄血涂片和姬姆沙染色法測(cè)定感染的流行程度,直到感染后12天。被感染小鼠的數(shù)量/被感染小鼠的數(shù)量和%的抑制在每個(gè)面板的底部。數(shù)據(jù)來(lái)自三個(gè)(單個(gè)抗原)或四個(gè)(混合抗原)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。P值(*P < 0.05);* * P < 0.01;***P < 0.001)采用單因素方差分析(A)或Mann-Whitney U檢驗(yàn)(B)計(jì)算,(A)每組小鼠數(shù)與(B)每組小鼠數(shù)相同。

標(biāo)簽:

免責(zé)聲明:本文由用戶上傳,與本網(wǎng)站立場(chǎng)無(wú)關(guān)。財(cái)經(jīng)信息僅供讀者參考,并不構(gòu)成投資建議。投資者據(jù)此操作,風(fēng)險(xiǎn)自擔(dān)。 如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除!

最新文章