關(guān)于酶制劑是什么原理,酶制劑是什么這個問題很多朋友還不知道,今天小六來為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、⑴低溫下保存:由于多數(shù)蛋白質(zhì)和酶對熱敏感,通常35℃~40℃以上就會失活,冷藏于冰箱一般只能保存一周左右,而且蛋白質(zhì)和酶越純越不穩(wěn)定,溶液狀態(tài)比固態(tài)更不穩(wěn)定。
2、因此通常要保存于-5℃~-20℃,如能在-70℃下保存則最為理想。
3、極少數(shù)酶可以耐熱:如核糖核酸酶可以短時煮沸;胰蛋白酶在稀HCl中可以耐受90℃;蔗糖酶在50℃~60℃可以保持15 min~30 min不失活。
4、還有少數(shù)酶對低溫敏感,如鳥肝丙酮酸羧化酶25℃穩(wěn)定,低溫下失活,過氧化氫酶要在0℃~4℃保存,冰凍則失活,羧肽酶反復(fù)凍融會失活等⑵制成干粉或結(jié)晶保存:蛋白質(zhì)和酶固態(tài)比在溶液中要穩(wěn)定的多。
5、固態(tài)干粉制劑放在干燥劑中可長期保存,例如葡萄糖氧化酶干粉0℃下可保存2年,-15℃下可保存8年。
6、通常,酶與蛋白質(zhì)含水量大于10%,室溫低溫下均易失活,含水量小于5%時,37℃活性會下降,如要抑制微生物活性,含水量要小于10%,抑制化學(xué)活性,含水量要小于3%。
7、此外要特別注意酶在凍干時往往會部分失活。
8、 _⑶在保護(hù)劑下保存:很早就有人觀察到,在無菌條件下,室溫保存了45年的血液,血紅蛋白僅有少量改變,許多酶仍保留部分活性,這是因為血液中有蛋白質(zhì)穩(wěn)定的因素,為了長期保存蛋白質(zhì)和酶,常常要加入某些穩(wěn)定劑:例如:①惰性的生化或有機物質(zhì):如糖類、脂肪酸、牛血清白蛋白、氨基酸、多元醇等,以保持穩(wěn)定的疏水環(huán)境。
9、②中性鹽:有一些蛋白質(zhì)要求在高離子強度(1 mol/L~4mol/L或飽和的鹽溶液)的極性環(huán)境中才能保持活性。
10、最常用的是:MgSO4、NaCl、(NH4)SO4等。
11、使用時要脫鹽。
12、③巰基試劑:一些蛋白質(zhì)和酶的表面或內(nèi)部含有半胱氨酸巰基,易被空氣中的氧緩饅氧化為磺酸或二硫化物而變性,保存時可加入半胱氨酸或巰基乙醇。
13、總之,對樣品的保存必須給以只夠的重視,一些常用酶的保存條件可參見《生物化學(xué)制備技術(shù)》(蘇拔賢主編)一書中的"一些酶保存的條件和穩(wěn)定性"表,其他各種生物大分子和生物制劑的保存條件,可查閱有關(guān)的文獻(xiàn)和酶學(xué)手冊。
本文分享完畢,希望對大家有所幫助。
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