原位雜交技術(shù)流程（原位雜交技術(shù)步驟）

關(guān)于原位雜交技術(shù)流程，原位雜交技術(shù)步驟這個(gè)問(wèn)題很多朋友還不知道，今天小六來(lái)為大家解答以上的問(wèn)題，現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧！

1、這個(gè)問(wèn)題問(wèn)到點(diǎn)子上了，呵呵 比如： 1.浸入乙酸酐（acetic anhydride）和三乙醇胺（tri－ethanolamine）中以減低靜電效應(yīng)，減少探針對(duì)組織的非特異性背景染色。

2、 2.將組織切片浸入預(yù)雜交液中可達(dá)到封閉非特異性雜交點(diǎn)的目的，從而減低背景染色。

3、預(yù)雜交液和雜交液的區(qū)別在于前者不含探針和dextran sulphate。

4、 3.雜交的溫度和時(shí)間雜交的溫度也是雜交成功與否的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，大約在30～60℃之間，根據(jù)探針的種類不同，溫度略有差異，雜交的時(shí)間如過(guò)短會(huì)造成雜交不完全，而過(guò)長(zhǎng)則會(huì)增加非特異性染色。

5、 4.雜交嚴(yán)格度（hybridization stringency）雜交條件的嚴(yán)格度（stringency）表示通過(guò)雜交及沖洗條件的選擇對(duì)完全配對(duì)及不完全配對(duì)雜交體的鑒別程度。

6、通過(guò)控制雜交溫度、鹽濃度等，可減弱非特異性雜交體的形成，提高雜交的特異性。

7、 5.洗滌的條件如鹽溶液的濃度、溫度、洗滌次數(shù)和時(shí)間因核酸探針的類型和標(biāo)記的種類不同而略有差異，一般遵循的共同原則是鹽溶液濃度由高到低而溫度由低到高。

8、必須注意的是在漂洗的過(guò)程中，切勿使切片干燥。

9、干燥的切片即使大量的溶液漂洗也很難減少非特異性結(jié)合，從而增強(qiáng)了背景染色。

本文分享完畢，希望對(duì)大家有所幫助。

標(biāo)簽：