人類基因組有自己的校對員和編輯，他們的手工并不像曾經(jīng)想象的那么凌亂。當(dāng)脫氧核糖核酸的雙螺旋在暴露于x光后受損時，分子機(jī)器會進(jìn)行基因“自動校正”來重組基因組——但這些修復(fù)通常是不完美的。就像你的智能手機(jī)可能會將拼錯的短信變成不連貫的短語一樣，該單元的自然DNA修復(fù)過程可以以一種看似隨機(jī)且不可預(yù)測的方式在斷點處添加或刪除DNA位。使用CRISPR-Cas9編輯基因使科學(xué)家能夠破壞特定位置的DNA，但這可能會導(dǎo)致“拼寫錯誤”，從而改變基因的功能。這種對CRISPR誘導(dǎo)的損傷的反應(yīng)被稱為“末端連接”，對于基因失敗是有用的，但是研究人員認(rèn)為這種反應(yīng)太容易發(fā)展為治療目的。
一項新的研究提出了這一觀點。通過創(chuàng)建一種機(jī)器學(xué)習(xí)算法來預(yù)測人類和小鼠細(xì)胞將如何應(yīng)對CRISPR誘導(dǎo)的DNA斷裂，一組研究人員發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞通常會以準(zhǔn)確和可預(yù)測的方式修復(fù)斷裂的基因，有時甚至?xí)⑼蛔兊幕蚧謴?fù)到其健康版本。此外，研究人員利用這種預(yù)測能力測試并成功糾正了患有兩種罕見遺傳病之一的患者的細(xì)胞突變。這項研究表明，細(xì)胞的遺傳自我糾正有朝一日可以與基于CRISPR的療法相結(jié)合，通過簡單地精確切割DNA，讓細(xì)胞自然愈合損傷，從而糾正基因突變。
這項研究發(fā)表在本周的《自然》雜志上，由理查德默(Richard Mer)領(lǐng)導(dǎo)，理查德默金教授是默金醫(yī)療保健轉(zhuǎn)型技術(shù)研究所所長，布羅德研究所(Broad Institute)副教授。麻省理工學(xué)院計算機(jī)科學(xué)和生物工程教授大衛(wèi)吉福德；以及布里格姆女子醫(yī)院遺傳學(xué)系醫(yī)學(xué)助理教授理查德舍伍德。吉福德說：“機(jī)器學(xué)習(xí)為人類治療學(xué)的發(fā)展提供了新的視野。“這項研究是計算實驗設(shè)計和分析與治療目標(biāo)相結(jié)合如何產(chǎn)生意想不到的治療方法的一個例子。”
“目前，我們還沒有一種有效的方法來準(zhǔn)確糾正許多人類疾病的突變，”劉說。“通過機(jī)器學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)證明，通過簡單地讓細(xì)胞自我修復(fù)，我們通?？梢灶A(yù)測地糾正這些突變。”許多疾病相關(guān)的突變涉及額外的或缺失的脫氧核糖核酸，這被稱為插入和缺失。研究人員試圖通過基于CRISPR的基因編輯來糾正這些突變。為此，他們用酶切割雙螺旋，插入缺失的DNA，或者用遺傳物質(zhì)模板作為藍(lán)圖，去除多余的DNA。然而，這種方法只適用于快速分裂的細(xì)胞，如血液干細(xì)胞。即便如此，它也只是部分有效，這使得它成為體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞類型的糟糕選擇。要在沒有模板修復(fù)的情況下恢復(fù)基因功能，我們需要知道細(xì)胞是如何修復(fù)CRISPR誘導(dǎo)的DNA斷裂的——這是一個直到現(xiàn)在都不存在的知識。
我們之前已經(jīng)注意到CRISPR修復(fù)結(jié)果模式的證據(jù)，吉福德實驗室開始認(rèn)為這樣的結(jié)果可以預(yù)測到足夠精確的模型；然而，他們需要更多的數(shù)據(jù)來將這些模式轉(zhuǎn)化為準(zhǔn)確的預(yù)測性理解。在麻省理工學(xué)院研究生Max Shen和布羅德研究所(Broad Institute)博士后研究員Mandana Arbab的領(lǐng)導(dǎo)下，研究人員開發(fā)了一種策略，觀察細(xì)胞如何修復(fù)小鼠和人類基因組中CRISPR靶向的2000個位點的文庫。在觀察細(xì)胞如何修復(fù)這些切口后，他們將獲得的數(shù)據(jù)注入機(jī)器學(xué)習(xí)模型。在德爾菲，他們敦促算法學(xué)習(xí)細(xì)胞如何對每個位點的切割做出反應(yīng)——也就是說，在每個受損基因中添加或刪除哪個脫氧核糖核酸位點細(xì)胞。他們發(fā)現(xiàn)德爾菲可以識別切割位點的模式，并預(yù)測哪些插入和缺失發(fā)生在校正基因中。在很多地方，這組矯正基因并不包含巨大的變異混合物，而是單一的結(jié)果，比如矯正致病基因。
事實上，在查詢了德爾?？梢酝ㄟ^切割適當(dāng)位置進(jìn)行矯正的疾病相關(guān)基因后，研究人員發(fā)現(xiàn)了近200種致病性遺傳變異體，其中大部分在被CRISPR相關(guān)酶切割后被修飾成正常的健康形態(tài)。它們還可以糾正患有兩種罕見遺傳疾病的患者的細(xì)胞突變，這兩種疾病是赫爾曼斯基-普德拉克綜合征和門克斯病。舍伍德說：“我們已經(jīng)證明，主要用作大錘的同一個CRISPR酶也可以充當(dāng)鑿子?！霸谀阕鲞@個實驗之前，能夠知道你的實驗最有可能的結(jié)果，對于許多使用CRISPR的研究人員來說是一個真正的進(jìn)步?！?
吉福德說：“我們曾希望能夠?qū)⒓膊∠嚓P(guān)基因恢復(fù)到它們的天然形式，看到我們的假設(shè)是正確的，這是非常有益的。InDelphi可在該網(wǎng)站上獲得，該網(wǎng)站允許世界各地的學(xué)術(shù)研究人員設(shè)計用于精確編輯的教學(xué)RNA。對修復(fù)致病突變感興趣的科學(xué)家可以查看這個網(wǎng)站，看看他們可以在哪里切割DNA，得到他們想要的結(jié)果。此外，科學(xué)家還可以利用該網(wǎng)站確認(rèn)旨在關(guān)閉基因的DNA切割的效率，或者確定模板驅(qū)動修復(fù)的最終連接副產(chǎn)物。在使用這種方法糾正臨床突變之前，還有更多工作要做。如果預(yù)測的結(jié)果導(dǎo)致一些有用的東西，無論是用于研究還是治療目的，這項研究表明，觸發(fā)細(xì)胞的自然“自我校正”可能是基因組編輯的有效方法。
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