2022年1月17日整理發(fā)布：干預(yù)睡眠剝奪的學(xué)習(xí)和記憶損傷作用的新靶點

2022年1月17日整理發(fā)布：睡眠是支持學(xué)習(xí)和記憶功能的重要過程，正常睡眠-覺醒周期可以促進(jìn)學(xué)習(xí)、鞏固記憶。而睡眠剝奪則干擾神經(jīng)元活動，破壞觸突可塑性的動態(tài)平衡，即睡眠突觸穩(wěn)態(tài)。而睡眠突觸穩(wěn)態(tài)是維持學(xué)習(xí)和記憶等認(rèn)知功能的生物學(xué)基礎(chǔ)。

作為睡眠剝奪的重要標(biāo)記物，Homer1a表達(dá)失衡可能參與調(diào)控這一過程并在損傷學(xué)習(xí)和記憶功能中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本文主要就Homer1a在睡眠剝奪及相關(guān)學(xué)習(xí)和記憶功能中的作用進(jìn)行綜述，為干預(yù)睡眠剝奪的學(xué)習(xí)和記憶損傷作用提供新的靶點。

1.睡眠剝奪與學(xué)習(xí)和記憶功能

睡眠剝奪是指各種原因?qū)е抡Ｋ叩娜笔顟B(tài)，表現(xiàn)為24h睡眠總時間<4h，并引起學(xué)習(xí)和記憶等認(rèn)知功能障礙在內(nèi)的一系列身心和行為異常變化。睡眠剝奪損傷學(xué)習(xí)和記憶功能的機制復(fù)雜，尚未完全明確。正常睡眠-清醒周期，通過腦區(qū)以及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、遞質(zhì)系統(tǒng)間復(fù)雜的相互作用予以調(diào)節(jié)，而相關(guān)腦區(qū)的神經(jīng)遞質(zhì)大多涉及學(xué)習(xí)和記憶等認(rèn)知功能。然而，睡眠剝奪可干擾神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能和神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)控，特別是對海馬體可塑性的影響，這直接決定了學(xué)習(xí)和記憶功能的狀態(tài)。

Noya等研究表明，睡眠剝奪破壞突觸蛋白的晝夜循環(huán)，消除了98%突觸神經(jīng)元的磷酸化周期，大幅度減少參與突觸傳遞的蛋白，而這些蛋白與學(xué)習(xí)和記憶密切相關(guān)。這為睡眠剝奪損傷學(xué)習(xí)和記憶功能提供了精確證據(jù)，但是這一過程的分子信號通路缺乏精確描述?；谒邉儕Z對人體的不利影響，積極探討睡眠剝奪對突觸可塑性的作用機制以及相應(yīng)的干預(yù)措施對改善受損的學(xué)習(xí)和記憶功能具有重要意義。

2.Homer1a的結(jié)構(gòu)與功能

Homer1是由誘導(dǎo)即刻早期基因編碼、轉(zhuǎn)錄和翻譯的一種骨架蛋白，參與構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸后致密物(post synaptic density，PSD)，其含有兩個結(jié)構(gòu)特征:N端為果蠅激活蛋白/血管舒張刺激磷酸蛋白同源結(jié)構(gòu)域1(enabled protein of dros ophila/vasodilator-stimulated phosphoprote in homology 1，EVH1);C端為兩個亮氨酸拉鏈模體和一個卷曲螺旋(coiled-coil，C-C)結(jié)構(gòu)。而Homer1a是由186個氨基酸構(gòu)成的Homer1蛋白，缺乏C-C結(jié)構(gòu)域。

由于Homer1a缺乏C-C結(jié)構(gòu)域，不能形成多聚體介導(dǎo)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，但可以通過mGluR非激動劑依賴性轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，即競爭性結(jié)合Homer1b/c的EVH1位點，進(jìn)而分解Homer1b/c-mGluR多聚體復(fù)合物，導(dǎo)致Homer1b/c參與構(gòu)成的蛋白信號復(fù)合體阻斷，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)IP3R信號通路、ERK1/2依賴性信號通路等。

Holz等研究表明，Homer1a可直接增強內(nèi)側(cè)前額葉皮層mGluR1/5信號傳導(dǎo)，導(dǎo)致mTOR途徑磷酸化增加。Homer1a主要通過與突觸可塑性調(diào)控相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)揮重要作用，與許多神經(jīng)精神疾病密切相關(guān)，如睡眠相關(guān)性疾病、神經(jīng)病理性疼痛、抑郁癥和創(chuàng)傷性腦損傷等。

3.睡眠剝奪與Homer1a

Homer1a在大腦中表現(xiàn)出強烈的晝夜節(jié)律變化，介導(dǎo)晝夜節(jié)律震蕩與突觸后信號傳導(dǎo)之間的通信基因。Diering等研究表明，睡眠期大鼠皮質(zhì)和海馬區(qū)Homer1a表達(dá)量較清醒期增加250%甚至更多，并通過mGluR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少PSD上AMPA受體20%的表達(dá)量，即突觸“縮小”。Homer1a驅(qū)動睡眠-覺醒周期突觸正常的縮放節(jié)律，是對學(xué)習(xí)和記憶相關(guān)的睡眠突觸穩(wěn)態(tài)假說(sleep homeostasis hypothesis，SHY)的有利支持。

Homer1a蛋白作為誘導(dǎo)即刻早期基因的表達(dá)產(chǎn)物，已被證明可由睡眠剝奪、谷氨酸鹽、BDNF和創(chuàng)傷等多種刺激物誘導(dǎo)，并可作為睡眠剝奪的生物學(xué)標(biāo)記物。睡眠剝奪可引起節(jié)律基因BMAL1的異常轉(zhuǎn)錄，并通過依賴于細(xì)胞內(nèi)cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(cAM Presponse element binding protein，CREB)，而誘導(dǎo)Homer1a基因的啟動，打斷Homer1a的晝夜節(jié)律性，導(dǎo)致Homer1a短期過表達(dá)。

Serchov等研究表明，睡眠剝奪可反向刺激BDNF過表達(dá)，并通過BDNF/TrkB受體作用，激活Ras/ERK/CREB信號級聯(lián)，而誘導(dǎo)Homer1a過表達(dá)。此外在一個大腦創(chuàng)傷模型中，Homer1amRNA的誘導(dǎo)則依賴于ERK1/2的活性表達(dá)。盡管不同的刺激物誘導(dǎo)Homer1a表達(dá)的信號途徑可能有所不同，但睡眠剝奪特異性激活CREB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而誘導(dǎo)Homer1a過表達(dá)，這可能是其損傷學(xué)習(xí)記憶功能的“第一分子信號”。

4.Homer1a-mGluR1/5信號通路的作用

mGluR1/5與Gq型G蛋白偶聯(lián)，通過磷脂酶C、IP3R依賴的鈣離子釋放和PKC發(fā)出信號。此外，MAP激酶、mTOR及突觸蛋白合成、內(nèi)源性素合成、酪氨酸激酶和磷酸酶也參與mGluR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。睡眠剝奪誘導(dǎo)Homer1a過表達(dá)，通過Homer1a-mGluR1/5信號通路介導(dǎo)突觸失穩(wěn)態(tài)和抗抑郁作用。

睡眠突觸穩(wěn)態(tài)作用：SHY認(rèn)為，通過突觸長時程增強的機制編碼覺醒過程中的經(jīng)驗信息，需要突觸強度和大小的凈增加來實現(xiàn)。但覺醒相關(guān)的突觸增強需要在睡眠期間通過突觸“縮小”來恢復(fù)內(nèi)穩(wěn)態(tài)，并允許進(jìn)一步的學(xué)習(xí)和記憶。突觸穩(wěn)態(tài)是神經(jīng)可塑性的一種非Hebbian形式，突觸經(jīng)歷局部和整體的強度變化來支持學(xué)習(xí)和記憶。而Homer1a-mGluR1/5被認(rèn)為是睡眠與突觸穩(wěn)態(tài)之間的關(guān)鍵信號通路，他們參與睡眠-覺醒過程中突觸縮放調(diào)控，進(jìn)而保持突觸穩(wěn)態(tài)平衡。

覺醒過程中，Homer1a低表達(dá)，負(fù)偶聯(lián)Homer1b/c-mGluR1/5與IP3R信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用減弱，通過下游PKC和ERK1/2信號通路增加突觸AMPA受體的表達(dá)，即突觸增強;睡眠期間，Homer1a過表達(dá)，介導(dǎo)Homer1b/cmGluR1/5復(fù)合物與IP3R解偶聯(lián)的作用增強，降低突觸AMPA受體表達(dá)，即突觸縮小，從而將mGluR1/5信號從“喚醒型”切換到“睡眠型”模式。

在睡眠剝奪刺激下，過表達(dá)的Homer1a一方面通過N端EVH1結(jié)構(gòu)域競爭性分解突觸PSD上Homer1b/cmGluR1/5復(fù)合物，切斷了其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，另一方面與mGluR5結(jié)合介導(dǎo)cAMP依賴的PKA，激活mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，最終影響突觸后膜AMPA受體的轉(zhuǎn)運、翻譯和活性。由此可見，Homer1a-mGluR1/5信號通路是睡眠剝奪打破睡眠-覺醒周期中突觸穩(wěn)態(tài)平衡的關(guān)鍵分子信號，這可能是睡眠剝奪損傷學(xué)習(xí)記憶功能的“第二分子信號”。

抗抑郁作用抑郁癥等壓力相關(guān)精神疾病與睡眠關(guān)系密切。抑郁癥多伴有睡眠障礙，但急性睡眠剝奪可以快速改善抑郁癥狀，這其中Homer1a-mGluR1/5信號通路發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

Holz等通過TAT-Homer1a模擬Homer1a過表達(dá)，TAT通過蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)域與全長Homer1a蛋白融合，具有大腦和細(xì)胞膜通透性，可使mGluR5信號從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)IP3R的Ca2+相關(guān)信號轉(zhuǎn)換到Akt-mTOR信號，進(jìn)而增強AMPA受體合成和質(zhì)膜轉(zhuǎn)運，減少了大鼠的抑郁樣行為。

而Li等研究表明，Homer1-mGluR5信號水平與慢性應(yīng)激抑郁樣行為呈明顯負(fù)相關(guān)，PERK-eIF22α信號通路是Homer1-mGluR5復(fù)合物下游的一個關(guān)鍵靶點，可磷酸化S129處的CREB并降低BDNF水平，導(dǎo)致海馬錐體神經(jīng)元表面AMPA受體內(nèi)化增強，最終導(dǎo)致突觸傳遞損傷和抑郁樣行為。

關(guān)于Homer1a-mGluR5信號通路調(diào)控AMPA受體的表達(dá)仍然存在爭議。睡眠剝奪介導(dǎo)突觸失穩(wěn)態(tài)是通過Homer1a阻斷mGluR5-Homer1b/c偶聯(lián)的PI3R-PKCγ激活信號而減弱海馬突觸AMPA受體表達(dá)。相反，睡眠剝奪介導(dǎo)的抗抑郁作用是通過激活Homer1a-mGlu5信號通路下游的Akt-mTOR活性而增強內(nèi)側(cè)前額葉皮層和海馬突觸AMPA受體表達(dá)。

睡眠剝奪刺激Homer1a過表達(dá)，但不同腦區(qū)AMPA受體的表達(dá)卻存在矛盾現(xiàn)象。Homer1a的區(qū)域特異性效應(yīng)可能是不同神經(jīng)回路中mGluR5信號的細(xì)胞類型特異性調(diào)節(jié)的結(jié)果。此外，Homer1a又能以雙相方式誘導(dǎo)海馬突觸AMPA受體的活性變化，可能是一個合理的解釋，值得深入研究。

5.Homer1a與突觸可塑性

突觸可塑性被認(rèn)為是學(xué)習(xí)和記憶功能的生物學(xué)基礎(chǔ)。長時間增強和長時間抑制是突觸可塑性的主要表現(xiàn)形式，睡眠可以促進(jìn)突觸可塑性形成，其中AMPA受體在對維持學(xué)習(xí)和鞏固記憶中具有關(guān)鍵作用。

睡眠剝奪損傷學(xué)習(xí)和記憶功能的機制較為復(fù)雜，目前仍在進(jìn)一步研究中，睡眠剝奪破壞海馬突觸可塑性可能是機制之一。Homer1a與海馬區(qū)突觸可塑性密切相關(guān)。Hennou等研究表明，Homer1a通過增強AMPA受體在海馬區(qū)突觸PSD中聚集，解耦聯(lián)Homer1b/c多聚體，改變PSD結(jié)構(gòu)，增強突觸可塑性。

Hu等研究表明，Homer1a以mGluR非激動劑依賴性轉(zhuǎn)導(dǎo)信號途徑介導(dǎo)突觸縮放，是神經(jīng)可塑性的一種非Hebbian形式。Homer1a介導(dǎo)非Hebbian形式的突觸縮放，對抗Hebbian型長時程增強引起的潛在過度興奮，使海馬體在睡眠中產(chǎn)生突觸保護(hù)，同時保留單個突觸中編碼的相對突觸重量和記憶信息。以上研究表明，Homer1a在突觸可塑性中有著重要作用，影響學(xué)習(xí)和記憶功能。

6.Homer1a與認(rèn)知功能相關(guān)疾病

睡眠問題通常與神經(jīng)系統(tǒng)疾病和年齡認(rèn)知衰老有關(guān)，在阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)和老年人中普遍存在睡眠-認(rèn)知障礙。睡眠剝奪相關(guān)的Homer1a信號系統(tǒng)可能參與認(rèn)知功能障礙的發(fā)生和發(fā)展。AD是一種病理性神經(jīng)退行性疾病，其特征是突觸退化、細(xì)胞丟失和認(rèn)知功能進(jìn)行性衰退。

AD患者的突觸丟失與淀粉樣β蛋白(amyloid β-protein，Aβ)斑塊的形成有關(guān)，而作為睡眠剝奪標(biāo)志物的Homer1a可誘發(fā)大腦Aβ的沉積增加。當(dāng)AD患者出現(xiàn)睡眠問題時，大腦皮質(zhì)層Homer1a過表達(dá)區(qū)域與Aβ沉積增加分布區(qū)高度重合、關(guān)系密切。此外，mGluR5可以和朊蛋白形成一種蛋白復(fù)合物，可作為Aβ的特異性受體致突觸功能障礙。但在AD動物模型中，外界刺激無法誘導(dǎo)Homer1a過表達(dá)，表現(xiàn)為明顯的抑制水平，這種對Homer1a的抑制效應(yīng)會減少神經(jīng)元大電導(dǎo)Ca2+激活K+通道的正常開放，從而增加電壓依賴性Ca2+通道開放，最終導(dǎo)致AD早期認(rèn)知功能障礙的發(fā)生。

正常的衰老與認(rèn)知功能障礙有關(guān)，尤其是學(xué)習(xí)和記憶功能，Homer1a可能參與認(rèn)知功能障礙過程。Homer1a/Vesl-1S蛋白含量在衰老過程中下降，反映了與年齡相關(guān)的突觸變化，導(dǎo)致空間學(xué)習(xí)、記憶形成及運動協(xié)調(diào)等功能降低。而海馬中Homer1a過表達(dá)，以及mGluR5、Homer1b/c蛋白及下游信號通路激活在改善老年大鼠認(rèn)知功能中起關(guān)鍵作用。此外，老年大鼠認(rèn)知完整性與Homer1a過表達(dá)呈正相關(guān)，伴有mGluR受體表達(dá)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的增強和焦慮相關(guān)行為的減少。

7.小結(jié)

正常的睡眠和睡眠-覺醒周期對維持學(xué)習(xí)、記憶功能至關(guān)重要。睡眠剝奪打破了睡眠的記憶鞏固和突觸穩(wěn)態(tài)功能，Homer1a作為睡眠剝奪誘導(dǎo)產(chǎn)生的重要標(biāo)記物，通過mGluR1/5非激動劑依賴性信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，作用于突觸，并在睡眠與認(rèn)知相關(guān)疾病中發(fā)揮重要作用。

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