慕尼黑大學(xué)的研究人員開(kāi)發(fā)了一種方法來(lái)確定使用超分辨率熒光顯微鏡標(biāo)記目標(biāo)蛋白的可靠性。
現(xiàn)代顯微鏡技術(shù)使得以驚人的細(xì)節(jié)檢查細(xì)胞的內(nèi)部運(yùn)作成為可能。 “我們現(xiàn)在可以在顯微鏡下觀察單個(gè)蛋白質(zhì)的排列和相互作用，”慕尼黑大學(xué)生命分子物理學(xué)主席兼 MPI 生物化學(xué)馬克斯·普朗克研究員 Ralf Jungmann 教授說(shuō)。
這位生物物理學(xué)家的團(tuán)隊(duì)最近開(kāi)發(fā)了革命性的RESI(順序成像分辨率增強(qiáng))方法。該技術(shù)可用于將熒光顯微鏡的分辨率提高至埃級(jí)——遠(yuǎn)低于光的經(jīng)典衍射極限。研究人員將 DNA 標(biāo)記分子精確地附著在他們想要更好地理解的分子上，對(duì)此至關(guān)重要。
Jungmann 的團(tuán)隊(duì)現(xiàn)已在《自然方法》雜志上提出了一項(xiàng)技術(shù)，可用于量化生物標(biāo)記分子與目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合程度。 “如果你想做出定量可靠的陳述，這絕對(duì)是至關(guān)重要的，”物理學(xué)家解釋道。
如果知道標(biāo)記效率，就可以通過(guò)這種方式進(jìn)行空間分辨蛋白質(zhì)組學(xué)。這使您不僅可以了解單個(gè)蛋白質(zhì)在細(xì)胞中的作用，還可以了解它們存在的程度以及它們的數(shù)量和行為在某些情況下如何變化。 “但這只有在我們能夠評(píng)估標(biāo)簽效果的情況下才有可能。”這是因?yàn)橹挥袠?biāo)記的蛋白質(zhì)在顯微鏡下才會(huì)發(fā)出閃光，從而變得可見(jiàn)。
Jungmann 團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)的方法通過(guò)向目標(biāo)蛋白添加參考生物標(biāo)志物使這種評(píng)估成為可能。該標(biāo)記在顯微鏡檢查過(guò)程中以不同的顏色“發(fā)光”，因此成功標(biāo)記的蛋白質(zhì)以兩種顏色出現(xiàn)。
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